Gli obiettivi formativi specifici del Modulo di Metodiche diagnostiche di Patologia Clinica sono quelli di consentire allo studente l’acquisizione delle nozioni fondamentali per la valutazione critica e l’interpretazione dei risultati delle principali tecniche diagnostiche di laboratorio.
1. Conoscenza e capacità di comprensione (Knowledge and Understanding)
Al termine dell’insegnamento lo studente dovrà dimostrare di conoscere e comprendere:
· I principi immunologici alla base della produzione e dell’utilizzo di anticorpi policlonali e monoclonali, incluse le tecniche di generazione mediante ibridomi e phage display.
· I fondamenti teorici delle principali metodiche immunometriche, con particolare riferimento alla tecnica ELISA.
· I principi fisici e biologici della citofluorimetria, inclusi parametri ottici (FSC, SSC, fluorescenza) e strategie di gating.
· I principi di separazione elettroforetica delle proteine e degli acidi nucleici e le basi teoriche del Western Blot.
· I fondamenti molecolari della PCR (Polymerase Chain Reaction), incluse le varianti applicative (RT-PCR, real-time PCR).
· I principi delle tecniche di sequenziamento del DNA/RNA (metodo Sanger e cenni alle tecnologie di nuova generazione).
· Le principali applicazioni cliniche delle metodiche di laboratorio in ambito diagnostico (oncologico, ematologico, infettivologico, immunologico).
2. Capacità di applicare conoscenza e comprensione (Applying Knowledge and Understanding)
Lo studente sarà in grado di:
· Descrivere e schematizzare le fasi operative delle principali metodiche immunologiche e molecolari.
· Interpretare correttamente i risultati ottenuti da ELISA, citofluorimetria, elettroforesi, Western Blot e PCR in un contesto diagnostico.
· Correlare il dato laboratoristico con il sospetto clinico, comprendendo il significato diagnostico e prognostico delle analisi eseguite.
· Riconoscere i principali fattori pre-analitici, analitici e post-analitici che possono influenzare l’affidabilità del risultato.
· Applicare criteri di qualità e controllo interno nelle procedure diagnostiche di laboratorio.
3. Autonomia di giudizio (Making Judgements)
Al termine del corso lo studente dovrà essere in grado di:
· Valutare criticamente l’appropriatezza di una metodica diagnostica in relazione al quesito clinico.
· Analizzare i limiti tecnici e interpretativi delle diverse metodiche di laboratorio.
· Riconoscere potenziali fonti di errore e proporre soluzioni operative per migliorare accuratezza e riproducibilità.
· Integrare dati provenienti da diverse tecniche (immunologiche, proteiche, molecolari) per formulare una valutazione diagnostica coerente.
4. Abilità comunicative (Communication Skills)
Lo studente sarà in grado di:
· Utilizzare correttamente la terminologia tecnico-scientifica propria della patologia clinica e della diagnostica di laboratorio.
· Descrivere in modo chiaro e strutturato protocolli, risultati e interpretazioni diagnostiche.
· Interagire efficacemente con altre figure professionali sanitarie (biologi, medici, tecnici sanitari di laboratorio biomedico) nel contesto del laboratorio clinico.
· Presentare e discutere casi applicativi relativi all’utilizzo delle tecniche analizzate.
5. Capacità di apprendimento (Learning Skills)
Lo studente svilupperà:
· Capacità di aggiornamento continuo sulle innovazioni tecnologiche in ambito diagnostico (es. nuove piattaforme di sequenziamento, immunodosaggi avanzati).
· Attitudine alla consultazione critica della letteratura scientifica di settore.
· Autonomia nello studio e nell’approfondimento delle metodiche diagnostiche applicate alla patologia clinica.
· Capacità di integrare conoscenze teoriche e competenze tecnico-pratiche in un’ottica di formazione permanente.
Lezioni frontali
Nessuno
Obbligatorio al 70%
Anticorpi policlonali e monoclonali. Tecniche di produzione: Ibridomi e Phage Display
ELISA
Citofluorimetria: principi e applicazioni
Elettroforesi e Western Blot
PCR: principi e tecniche
DNA/RNA Sequencing
Esempi di applicazioni clinica delle tecniche di laboratorio
Abbas, Lichtman, Pillai. Immunologia cellulare e molecolare. Edra; 9° edizione 2018
Mauro Maccarrone. Metodologie Biochimiche e Biomolecolari. Zanichelli. 2019
| Argomenti | Riferimenti testi | |
|---|---|---|
| 1 | Anticorpi monoclonali | Mauro Maccarrone. Metodologie Biochimiche e Biomolecolari. Zanichelli. 2019; Abbas, Lichtaman, Pillai. Immunologia cellulare e molecolare. Edra; 9° edizione 2018 |
| 2 | ELISA | Mauro Maccarrone. Metodologie Biochimiche e Biomolecolari. Zanichelli. 2019 |
| 3 | Electrophoresis and Western blot | Mauro Maccarrone. Metodologie Biochimiche e Biomolecolari. Zanichelli. 2019 |
| 4 | Biologica molecolare (PCR, microarray, sequencing) | Mauro Maccarrone. Metodologie Biochimiche e Biomolecolari. Zanichelli. 2019 |
Esame orale sugli argomenti trattati a lezione
-Sandwich ELISA
-Elettroforesi in condizioni native e denaturanti
-Pirosequenziamento